Глава 15
Размножение
Прежде, чем мы начнём размножение, мы поговорим о простом пути для тех, кто хочет научиться простым процедурам размножения, и затем мы будем делать это немного более продвинуто.
Сначала о простом. Возможно, вы захотите произвести семена того сорта, который приобрели. Имея два растения, вы можете получить семена. Если вы разводите растения для продолжения сорта, вы не сможете полностью реплицировать родительские растения, если только это не IBL (объясним позже), но семена, которые вы получите, будут обладать большинством родительских свойств. Некоторые из потомков будут похожи на родителей по свойствам, а другие могут отличаться по цвету, силе и вкусовым качествам.
Производство семян
Насколько легко производить семена? Это довольно легко если у вас есть здоровые растения и постоянные условия для выращивания. Когда мужское растение разбросает пыльцу в помещении, это осеменит женские цветы. По окончании периода цветения в женских цветах будут семечки. Обычно они сероватые на вид. Если они белые – значит, еще не созрели, и вы собрали их слишком рано. Дождитесь конца периода цветения чтобы собирать семена. Семена будут внутри женских цветов. Потребуется некоторое время, чтобы отсортировать их оттуда. Если вы хотите хранить семена более двух лет, храните их в морозилке. До этого времени храните их в маленькой кассете из-под фотопленки.
Пыльца
Кассеты из-под фотопленки идеальное хранилище для пыльцы мужских растений. Вы можете хранить ее там до следующего урожая. В морозилке пыльцу можно хранить до 18 месяцев. Но все же шансы сохранить ее малы. Лучше использовать пыльцу в течение 6 месяцев. Как только цветок готов раскрыться, пыльцу уже можно извлекать из семенных коробочек. Лучше собирать пыльцу до того как она упадет на листья. Для опыления женского растения собранной пыльцой, просто потрясите пыльцой над женскими цветами.
Простое размножение
Хотите разводить растения чтобы получить как можно больше семян? Это зависит от того, какую цель вы преследуете. Если вы хотите получить новые сорта, тогда читайте про основы генетики. Если же вы хотите получить семена от родителей понравившегося вам сорта или хотите получить гибрид двух растений – тогда читайте далее.
Как продолжать сорт семенами
Итак, вы купили за 120 долларов семена Silver Haze и хотите получить больше семян этого сорта, чистого Silver Haze. Это легко. Просто убедитесь, что выращиваемые вами женские и мужские растения Silver Haze из одной партии семян. Не берите семена из другой партии. Далее просто дайте мужским растениям опылить женские и вы получите семена этого сорта. Но потомки потеряют оригинальные свойства родителей (если только сорт, который вы разводите, был не IBL).
Как получить простой гибрид
Это просто. Возьмите женское растение одного сорта, а мужское другого. Скажем, Big Bud и Skunk. Результатом будет Big Bud X Skunk, но среди полученных потомков будут различия. У некоторых будут доминировать свойства Skunk у некоторых Big Bud, а также могут проявиться свойства, которых вообще не было у родителей (в том случае если родители не были IBL). Если вы хотите сосредоточиться на получении большего количества семян с определенными свойствами без отклонений (т.е. создавая однородные растения), тогда читайте введение в основы генетики.
Введение в основы генетики
Генетику не так просто понять, не владея базовыми понятиями этой науки. Поэтому мы остановимся сначала на них.
Мы будем оперировать этими терминами на протяжении всей главы, поэтому усвойте смысл этих терминов сразу.
Ген:
Единица наследственности, которая передается от родителей к потомку в гаметах обычно часть хромосомы и контролирующая или определяющая определённое свойство потомка. (Существуют гены ответственные за цвет листьев, форму листьев, структуру стебля, запах, силу и т.д.).
Аллели:
Любое количество альтернативных друг другу генов. (Например: ген, отвечающий за пурпурную окраску цветов может иметь 2 формы: один отвечает за пурпурный, а другой за темно-красный).
Гомозиготный:
Индивидуум, имеющий одинаковые аллели в одном или более положении гена на генетической карте или в хромосоме. Такие растения дают чистых потомков, без отклонений. (Ваше растение гомозиготное по одному свойству, если в паре ответственных за это свойство генов оба гена одинаковы).
Гетерозиготный:
Индивидуум, имеющий разные аллели в одном или более положении гена на генетической карте или в хромосоме. (Ваше растение гетерозиготное по одному свойству, если гены в паре ответственные за это свойство, неодинаковы.)
Фенотип:
Организм, зрительно отличающийся от других. (Как ваше растение выглядит – это фенотип. Это общие свойства характеристики, которые вы можете наблюдать у вашего растения. Например, это может быть запах или вкус.)
Генотип:
Генетическая конституция индивидуума. В отличие от фенотипа, полный генный набор индивидуума или группы. (Как ваше растение устроено на химическом уровне, какие свойства оно может наследовать, этого не видно невооруженным глазом, это и называется генотипом. Это суммарная генетическая информация, которую несет ваше растение и которую могут наследовать его потомки.)
Доминирующий:
О гене или аллели: проявляется даже когда наследуется только от одного родителя.
О наследственной черте: контролируемые этим геном; проявляющиеся у индивида за исключением когда аллели присутствуют для обоих. (Ген называют доминантным когда его эффект может наблюдаться в фенотипе растения. Только одна доминантная аллель в паре генов должна быть представлена чтобы проявиться в фенотипе вашего растения).
Рецессивный:
О гене, аллели, наследственной черте: проявляется только у гомозиготов, будучи скрытым у гетерозиготов доминантной аллелью или наследственой чертой. (Ген называется рецессивным когда его эффект не проявляется фенотипе растения, только когда присутсвует одна аллель. Такая же аллель должна присутствовать дважды в паре генов чтобы она проявилась в фенотипе.)
Локус:
Местоположение определенного гена в хромосоме.
Хромосома:
Нитевидная структура нуклеиновых кислот и белка которая несет набор связанных генов и присутствуют в единственном количестве у прокариотов и в множественном (обычно в паре) у высших клеточных организмов.
Пары генов
Все живое создано из генных паттернов. Паттерн можно представить в виде застежки «молнии» - одна сторона от матери другая от отца. Местоположение каждого гена – определенная ячейка такой молнии, контролирует один бит информации о возможном свойстве растения. Каждое местоположение генов содержит 2 гена – один от отца другой от матери. Обозначают их парами букв – например, Аа, АА, Бб, бб, и т.д. Заглавные буквы обозначают доминантный ген, прописные – рецессивный ген. Буква это всего лишь удобное обозначение, несущее информацию о том какое свойство контролирует ген. Назначить можно любую букву.
Доминанты и рецессивы
Отдельные гены внутри локуса могут быть доминантными или рецессивными. Доминантный ген имеет более сильное действие, и если такой ген присутствует в паре. то рецессивный не проявится. Например, ген А – доминантный - отвечает за большие шишки, ген а – рецессивный - за маленькие. Тогда в нашем растении с генотипом Аа будут большие шишки. Чтобы рецессивный ген проявил себя необходимо чтобы оба гена в паре были рецессивными.
Изменение генов
Занимаясь размножением мы можем определять скажем окраску цветов у растения, или что наиболее важно какой окрас цветка будет у потомка двух растений. Конечный результат будет тем не менее результатом более чем одного локуса. Растение может иметь несколько генов отвечающих за цвет различных частей растения. Генетическая структура растения довольна сложна.
Частичное доминирование
Возможна комбинация двух доминантных генов в одном локусе. Их называют частично доминантными генами и обычно обозначают одинаковыми заглавными буквами – АА, например. Они действуют также как и пара доминантный-рецессивный, но с той разницей что сработать может любой из них.
Равновесие Харди-Вайнберга
Введение
Для понимания идей размножения необходимо понимать закон равновесия Харди–Вайнберга. Наука изучающая размножение называется популяционная генетика. Возможно вы задавали себе такой вопрос:
«Если некоторые болезни являются доминантной чертой тогда почему большинство населения не болеет ими?»
Такой же вопрос можно задать и в отношении размножения каннабиса. Если пурпурные цветы это доминантная черта тогда почему потомки такого сорта не обладают пурпурными цветами. Или почему я селекционирую виды Indica а получаю потомка с листьями как у Sativa. Почему это происходит? Закон равновесия Харди-Вайнберга (Х-В) поможет ответить на эти вопросы.
Прежде всего скажем, что подобные вопросы отражают всеобщее заблуждение о том, что доминантный аллельный ген всегда имеет наибольшую вероятность проявления в популяции, чем рецессивный.
Нет логики за таким представлением о доминантных чертах как о тенденциях для целой популяции. Также как нелогично полагать что рецессивные свойства должны выродиться.
Ген может проявиться с большей или меньшей вероятностью, не зависимо от того как выражен аллельный ген. Аллель также может изменяться в зависимости от определнных условий. Эти изменения в вероятностях появления гена со временем влекут за собой изменения в разных характеристиках растения.
Равновесие Х-В показывает изменилась или нет частота появления того или иного гена в популяции.
Популяция – группа особей одного вида или сорта [например, cannabis Indica или cannabis Sativa (виды), или Skunk#1 или Master Kush (сорта одного вида)]
существующих на данной территории и размножающихся друг с другом. Это означает что они являются носителями одного генного набора, который называется генофондом.
Каждый генофонд содержит все аллели для всех характерных черт данной популяции.
Эволюционируя живые организмы меняют частоты появления тех или иных генов. Вот почему мы имеем разные типы растений каннабиса.
Частота появления аллельного гена – это отношение числа раз появления этого аллельного гена к общему числу аллельных генов отвечающих за этот признак.
число раз появления аллельного гена / общее число аллельных генов в генофонде
Закон Х-В описывает теоретическую ситуацию в которой генофонд не изменяется. Это означает что втакой популяции нет эволюции.
Для примера допустим популяцию генофонд которой содержит аллельные гены Б и б. Пусть, с – частота появления доминантного аллельного гена Б, д- частота появления рецессивного аллельного гена б.
[В большинстве случаев вы обнаружите что с и д в действительности являются п и ку.]
Сумма всех аллельных генов должна быть равна 100%.
Так, с+д=1.
Все возможные случайные комбинации между членами популяции равны (с*с)+2сд+(д*д), т.е. (с+д)*(с+д).
Мы подробно объясним все это позднее.
Частоты появления б и Б остаются неизменными от поколения к поколению, если:
1. Популяция достаточно большая.
2. Нет мутаций.
3. Нет предпочтений. Например, мужчина с парой ББ никогда не предпочтет женщину с набором бб.
4. Популяция замкнута.
5. Естественный отбор не должен предпочитать какого-то определенного индивида.
Допустим что генофонд состоит из 12 генов Б и 18 генов б. Теперь помните что сумма всех аллелей равна 100%. Это означает что 12+18=30 и есть 100%.
Если мы хотим найти вероятности появления Б и б, а также генотипические вероятности В,б и Бб мы должны применить стандартную формулу:
f(B)= 12/30=0.4=40%
f(b)=18/30=0.6=60%
Итак, мы знаем соотношение: c+d=0.6+0.4=1. Мы убедились, что c+d=1.
Очень просто, да.
Помните, что все возможные комбинации членов популяции (с*с)+2сд+(д*д) или (с+д)*(с+д). Тогда, c+d=0.6+0.4=1.
И (c*c)+2cd+(d*d) = BB+Bb+bb = 0.24+0.28+0.3 = 1.
Это означает, что размер популяции может увеличиться но частоты появления генов Б и б останутся прежними.
Теперь предположим что мы нарушили 4-ый закон – о замкнутости популяции.
Добавим еще 4 гена б.
б+б+б+б входят в генофонд. Это уже 34 гена вместо 30. Каковы же будут частота появления генов и частота генотипа?
f(B)= 12/34=0.35=35%
f(b)=22/34=0.65=65%
f(BB)= 0.12 f(Bb)=0.23 f(bb)=0.42
Это не дает в сумме 1. Следовательно если мы сделаем популяцию открытой закон равновесия не срабатывает. То есть если в популяцию вводятся новые гены то изменяется частоты появления генов в ней. Но если в эту популяцию не будет добавления других генов, то частота равная 0.42 так будет передаваться от поколения к поколению.
Это всего лишь простой пример с которого вы начали знакомство с генетикой. Если что-то вам сейчас не понятно далее все станет на свои места. Возможно кто-то из вас задастся вопросом: Как узнать что какой-то признак например цвет бутона гомозиготный доминантный или гетерозиготный или гомозиготный рецессивный?
При покупке семян вам возможно сказали что определенный признак напрмер сила гомозиготный доминантный или гетерозиготный или гомозиготный рецессивный. Но если есть сомнения вы можете легко сми проверить особенно если вы собираетесь в дальнейшем заниматься разведением растений. Процедура называется Test Cross.
Перекрестный тест
Определить фенотип растения не представляет труда. Вы смотрите на растение и видите его фенотип. Определить генотип только через визуальное наблюдение невозможно. Гены сами по себе невидимы – видимыми являются признаки, за которые они отвечают.
Итак, существует три возможных генотипа. Пусть, Golden Bud– доминантный признак, Silver Bud - рецессивный. Тогда,
Гомозиготный доминантный: BB = Golden Bud
Гетерозиготный: Bb = Golden Bud
Гомозиготный рецессивный: bb = Silver Bud.
(цвета бутонов Golden Bud и Silver Bud – это фенотип. b и B – это обозначения генотипа.)
Причина по которой Bb дает золотой бутон а не серебряный в том что ген B доминирует над b.
Большинство фенотипов визуально наблюдаемы, но такие признаки как вкус и запах также являются фенотипами. Если рассматривать большинство сортов сатива например Haze можно заметить что листья у них светло зеленые но иногда в популяции среди 100 листьев можно заметить один-два темно зеленые листа. Это означает что темно зеленый окрас листьев является рецессивным признаком. Нельзя быть до конца уверенными в предположениях о том какой признак является рецессивным а какой доминантным пока не проведем тест но частота появления гена может подсказать это. Если золотые бутоны преобладают на растениях то можно предположить что этот цвет является доминирующим над серебряным цветом, который соответственно будет рецессивным.
Нам уже известно что только единственный генотип дает рецессивный признак - гомозиготный рецессивный. Так, если растение проявляет рецессивные признаки в фенотипе, то его генотип - гомозиготный рецессивный.
Растение с рецессивным признаком всегда имеет гомозиготный рецессивный генотип.
Но это ставит перед нами проблему. А золотые бутоны или светло зеленые листья - это гомозиготный доминантный или гетерозиготный признак?
Чтобы ответить на этот вопрос используют перекрестный тест: скрещивают растение с неизвестным генотипом с растением, которое по этому же признаку имеет известный генотип - гомозиготный рецессивный.
Чтобы это осуществить нам нужно еще одно растение каннабиса противоположного пола с гомозиготным рецессивным генотипом по исследуемому признаку. Для нашего примера мы остановимся на цвете бутона. У нас есть уже несколько растений с серебряными бутонами и мы предположили что это рецессивный признак. Давайте используем их и посмотрим что произойдет. Опыляем женское растение (неважно рецессивное оно или доминантное) получаем семена и высаживаем их. После 3-7 месяцев мы получаем результат.
Это подводит нас к следующему важному правилу, которое нам необходимо выучить.
Если хотя бы один из потомков проявит рецессивный признак, значит генотип родителя с доминантным признаком был гетерозиготным.
Мы объясним это позже. Важно отметить, что
чем больше растений вы тестируете, тем выше вероятность получения достоверного результата.
В нашем примере неизвестный нам генотип или BB или Bb. Внесем эту информацию в так называемые квадраты Пунне.
Второй возможный результат с ?=b. Это означает, что часть потомков будет с золотыми бутонами (bb).
В первом случае мы не сможем получить Silver Bud в потомстве.
Во втором возможном случае мы получим часть растений с золотыми бутонами часть с Silver Bud. И мы можем подсчитать частоту появления того или иного цвета.
Bb+Bb = 2Bb
bb+bb = 2bb
2 растения из 4-х будут с золотыми бутонами и 2 растения из 4-х будут Silver Bud. Таким образом мы получаем процентное соотношение 50:50.
Второй возможный вариант потомства говорит нам следующее:
- Чтобы передать рецессивный признак каждый из родителей нуждается по меньшей мере в одном b ( например, в нашем случае рецессивный Silver Bud).
- Если в потомстве проявляется хотя бы один рецессивный признак (в нашем случае Silver Bud) тогда неизвестный родитель B? - это Bb. Это не может быть BB.
Помните:
Гомозиготный доминантный: BB = Golden Bud
Гетерозиготный: Bb = Golden Bud
Гомозиготный рецессивный: bb = Silver Bud.
Итак, если при скрещивании родителя Golden Bud с родителем Silver Bud получается потомство только с Golden Bud, тогда родитель должен быть гомозиготным доминантным для этого признака. Если у родителя есть Silver Bud, значит он гетерозиготный.
Правила следущие:
- Растение с доминантным признаком всегда скрещивается с растением с рецессивным признаком.
- Если ХОТЯ БЫ ОДИН потомок проявляет рецессивный признак, то генотип - гетерозиготный.
- Если ВСЕ потомки имеют доминантный признак, это гомозиготный доминантный генотип.
- Чтобы получить достоверные результаты необходимо большое число растений для эксперимента.
Это ваш первый шаг в мир размножения потому что:
(1) Когда вы размножаете растения, вы хотите продолжить какой-то понравившийся вам признак (какой-то внешний признак, или вкус, или высоту растения).
(2) Чтобы осуществить это, вам необходимо знать какой это признак: гомозиготный доминантный гетерозиготный или гомозиготный рецессивный.
(3) Выяснить это вы можете с помощью перекрестного теста.
Может вознинуть вопрос – как продолжить у потомков сразу несколько родительских признаков например вкус, запах, силу и цвет? Чтобы ответить на этот вопрос вернемся снова к равновесию Х-В.
Закон равновесия Х-В Часть 2
Если скрестить два гетерозиготных (Bb) по признаку растения что мы получим?
Итак, в этой группе потомков процентное соотношение будет таким:
1 BB
2 Bb
1 bb.
Это означает, что:
25% потомков гомозиготны по доминантной аллели (BB),
50% гетерозиготны подобно родителям (Bb) и
25% гомозиготны по рецессивной аллели (bb).
Рассмотрим это подробнее. 25% потомков в отличие от своих родителей проявят рецессивный признак bb. То есть, даже взяв обоих родителей у которых наблюдаются только золотые бутоны, но гетерозиготных по этому признаку, мы получим потомство с серебряными цветами. Но поскольку оба родителя доминантны по золотому окрасу цветов, то они не проявляют серебряного окраса.
Это и есть размножение. Когда у нас есть сорт который мы хотим сохранить, как узнать что нужное нам свойство действительно сохранится в процессе размножения?
Для этого и существует перекрестный тест. если мы производим семена из сорта купленного нами в банке семян как можно быть увереным что потомки будут обладать всеми необходимыми нам свойствами? Итак, если признак(и) необходимые нам гомозиготные доминантные у обоих родителей тогда у потомства никогда не проявятся рецессивные гены по этому признаку. Докажем это:
Также, если оба родителя обладают рецессивным признаком, то у потомства нет шансов проявить доминантный признак.
Итак, мы начинаем понимать, для того чтобы сохранить свойство растения правильно мы должны знать гомозиготное оно, гетерозиготное, или гомозиготное рецессивное, чтобы ПРЕДСКАЗАТЬ РЕЗУЛЬТАТЫ ДО ТОГО КАК ОНИ ПРОИЗОЙДУТ. Для этого и существует наука – чтобы понять генотип признака, предсказать результат скрещивания и подавить нежелательный признак. Как можно это осуществить? Об этом мы расскажем позже после изучения еще некоторого материала.
Австрийский монах Грегор Мендель (1822-1884) открыл основные правила наследования, анализируя результаты своих наблюдений за размножением растений гороха. Два сорта гороха давали постоянное потомство, если размножение велось строго внутри популяции этого сорта, без вмешательства другой. Потомки обладали следующими постоянными признаками:
Поскольку внутри каждого сорта гороха не происходило никаких изменений он предположил что сорта гомозиготны по этим признакам. Поскольку эти сорта были от одного вида гороха Мендель предположил что либо белые цветы рецессивны либо розовые. Он использовал обозначаение для генотипа – SS для белых цветов и ss для розовых. Он знал, что они не могут быть Ss потому что одна группа не проявит свойств другой группы, если она замкнутая.
Рассмотрим таблицу Пунне где SS = растение гороха №1 с белыми цветами и ss = растение гороха №2 с розовыми цветами.
То есть все потомки растений №1 будут с белыми цветами (SS).
То есть, все потомки растения №2 будут с розовыми цветами (ss).
Первое скрещивание:
Мендель скрестил два сорта. Результатом стало появление у потомства только белых цветов! Смотрите таблицу:
До этого момента Мендель не знал какое из растений несет доминантный признак. После появления гибридов это стало очевидно: растение №1 содержит доминантный генотип для белых цветов, а растение №2 рецессивный генотип для розовых цветов. Также он выяснил, что растение №2 несет рецессивный генотип для окраса цветка.Это означает что в следующих скрещиваниях с другими сортами гороха он мог бы определить является ли этот признак гомозиготным или гетерозиготным, поскольку он уже определил рецессивный признак (ss).
Помните правила перекрестного теста для определения гомозиготности или гетерозиготности признака? Напомним их еще раз:
1. Растение с доминантным признаком всегда скрещивается с растением с рецессивным признаком.
2. Если ХОТЯ БЫ ОДИН потомок проявляет рецессивный признак, то генотип - гетерозиготный.
3. Если ВСЕ потомки имеют доминантный признак, это гомозиготный доминантный генотип.
4. Чтобы получить достоверные результаты необходимо большое число растений для эксперимента.
Итак, Мендель после первого скрещивания получил потомков только с белыми цветами (Ss). После второго скрещивания (двух потомков) он получил такой результат:
И получил 3 разных генотипа. Это означает, что:
25% потомков гомозиготны по доминантной аллели
50% потомков гетерозиготны и
25% потомков гомозиготны по рецессивной аллели.
Итак! В первом скрещивании Мендель не получил рецессивных признаков. Но после скрещивания гибридов, вследствие того что они оказались гетерозиготными, он получил три различных генотипа.
В научных терминах первое скрещивание между растениями называется F1 скрещиванием или поколением F1. Последующее скрещивание этих потомков называется F2 скрещиванием или поколением F2.
Сейчас имея 3 разных генотипа вы сможете сами построить таблицы Пуннетта для каждого из них чтобы посмотреть что получится. Сравните полученные вами результаты с тем, что вы уже узнали о процентных соотношениях и посмотрите как это все взаимосвязано. Это очень просто если вы знаете правила… но из любого правила есть исключения.
Еще раз о частотах:
Нам известно что результат скрещивания 2-х гетерозиготных родителей даст соотношение 50/50 относительно аллелей (помните, что генотип может быть Ss, SS или ss, а аллель или S, или s). Посмотрите на таблицу, где приведены результаты скрещивания двух гетерозиготных родителей и подсчитайте число аллелей.
SS
Ss
Ss
ss
То есть, мы видим S S S S (4*S) и s s s s (4*s).
Если мы разделим их, будет очевидней:
SS
S
S
s
s
ss
Напомним еще раз,
если скрестить 2 гетерозиготных родителя соотношение аллелей будет 50/50.
А сейчас вспомните закон равновесия. Ранее мы описали популяцию с генофондом, в котором сумма всех аллелей равна 100%. Но мы можем иметь другие соотношения, например, 80% имеют S и 20% имеют s, или 40% имеют S и 60% имееют s. Давайте взглянем на эти исключения из правил и посмотрим где именно происходит сбой.
Вот 5 основных причин, вследствие которых нарушается закон равновесия Х-В.
- Мутация
- Миграция генов
- Генетическое непостоянство
- Не случайное осеменение
- Естественный отбор
Рассмотрим их подробно.
Мутация
Мутация – это изменение в генетическом материале, которое может привести к увеличению наследуемых вариаций в потомстве. В природе, например, к этому может привести подвержение радиации. Результатом будет мутация генетического кода растения и как следствие при размножении внутри этой же популяции появляется новый чужеродный генетический материал. И хотя популяция была закрытой мутация одного единственного растения будет равносильна вмешательству другого сорта в эту популяцию.
Миграция генов
Когда мы говорим о популяции растений мы имеем в виду группу растений которые размножаются между собой без любого вмешательства извне. Со временем популяция достигает равновесия и остается в равновесном состоянии до тех пор пока туда не мигрирует другая популяция, которая принесет новые гены в генофонд. Это называется интрогрессией. В процессе интрогрессии в популяции проявляется много новых признаков.
Генетическое непостоянство:
Если популяция маленькая то равновесие может быть нарушено. Некоторые члены популяции уничтожаются случайным образом. Можно заметить как увеличивается или уменьшается частота появления аллелей.
Неслучайное осеменение и естественный отбор:
Здесь предполагается некоторое внешнее влияние на популяцию. Если некоторые цветы развились быстрее других тогда они получат семена раньше. Или например если все мужские растения выбросили семена раньше чем успели зацвести некоторые женские растение, получатся синсемиллы. Это означает что неуспевшие опылиться женские растения не внесут свой вклад в генофонд популяции и равновесие снова не будет достигнуто.
Благодаря естественному отбору окружающая среда может явиться причиной проблем для части растений. Если эта часть не выживает, то не происходит ее вклада в генофонд. Таким образом можно до определенной степени контролировать частоту проявления того или иного признака в популяции, а это и есть задача бридинга.
Как получить чистый сорт
Размножение каннабиса полностью основано на манипуляциях с частотой появления тех или иных генов. Большинство сортов продающихся уважаемыми бридерами через банки семян постоянны. Это означает что бридер заблокировал определенные гены так что генотипы этих признаков гомозиготны.
Представим, что бридер имеет 2 сорта каннабиса - Master Kush и Silver Haze. Он делает список признаков растений. И помечает «*» те, которые ему нужны для нового сорта.
Это означает, что желаемый сорт, назовем его Silver Kush, будет обладать следующими признаками:
Итак необходимые гены находятся в обоих родителях – в генофонде Master Kush и в генофонде Silver Haze. Мы можем просто скрестить оба сорта и надеяться на лучшее, а можем предварительно расчитать генотип для каждого признака и полученные результаты применить для получения чистого сорта (IBL).
Первое, что должен сделать бридер, понять генотипы каждого признака, которые присутствуют в его новом сорте. Поскольку бридеру надо обособить 4 признака, то ему необходимо знать 4*2=8 генотипов.
Начнем с бледно-зеленых листьев Silver Haze. Прежде всего надо вырастить как можно больше растений Silver Haze. Если в популяции окажутся не только светло-зеленые листья, тогда признак гетерозиготен. Если нет, то признак является гомозиготным, обозначим его как M. Он может быть либо доминантным MM, либо рецессивным mm.
Если признак гетерозиготен нам надо его обособить прежде, чем идти дальше. Это делается через селективное размножение.
Рассмотрим родителей:
Если оба родителя были MM тогда мы не увидим в потомстве листьев других цветов кроме светло-зеленых. Это обособленный признак. Мы знаем что этот признак всегда будет доминантным в этой популяции, без изменений.
Если один из родителей был гомозиготен а другой гетерозиготен мы получим две равновероятных вариации в популяции. Одна будет гомозиготной, другая гетерозиготной.
Если оба родителя были гетерозиготны, тогда соотношение будет 25% MM 50% Mm 25% mm.
И хотя сейчас мы можем увидеть вероятности появления генов, мы все еще не знаем светло-зеленый окрас листьев это рецессивный признак или доминантный. Это можно узнать с помощью перекрестного теста.
Мы не будем останавливаться на том что было сказано ранее о перекрестном тесте мы покажем как обособить необходимый нам генотип, который является или MM mm потому что нам нужен чистый признак. Также необходимо сохранить используемые родительские растения.
Чтобы сохранить родительские растения используйте вегетаивное размножение! Один и тот же генетический материал будет передаваться от клона к клону.
Через несколько перекрестных тестов мы сможем добиться обособленности признака, который будет либо рецессивным либо доминантным, а гетерозиготные растения исчезнут из нашей популяции. Независимо от того MM это или mm, мы можем вывести чистый признак путем размножения с другими родителями, которые несут соответственно либо MM либо mm. Так мы должны сделать несколько перекрестных тестов для обнаружения мужского или женского растения с MM или mm для этого признака. Сделав это, мы обосабливаем генотип и внутри популяции он будет постоянен.
Итак, если мы откроем банк семян под названием ООО «Только светло-зеленые листья, а все остальное не постоянно», то наши семена будут давать растения ТОЛЬКО со СВЕТЛО_ЗЕЛЕНЫМИ ЛИСТЬЯМИ, и покупатели будут довольны. В реальности же, они хотят в точности то растение которое выиграло Cannabis Cup в прошлом году…или по-меньшей мере близкое к этому растение. Так что нам необходимо обособить все признаки из-за которых растение получило Cannabis Cup чтобы покупатели порадодовались своей покупке. Я надеюсь вы поняли идею.
Сколько тестов необходимо провести, чтобы узнать генотип, точно сказать нельзя. Вы должны использовать обширный отбор растений, чтобы достичь цели, но тем не менее это даст результат в отличие от неселективного размножение наобум. Каждый признак должен быть локализован в популяции, так чтобы популяция стала гомозиготной по этому признаку. Следующий шаг, локализовать остальные признаки в этой же популяции.
Итак, наиболее сложный этап.
Когда вы работаете с признаком вы должны постоянно помнить о других необходимых вам признаках.
Вы можете случайно локализовать другой ненужный вам признак или даже удалить из популяции необходимый вам. Если это случится вам придется еще тяжелее поработать над сохранением признаков необходимых вам и исследовать генотипы через многократные перекрестные тесты. Со временем через отбор и ведение записей вы получите чистый сорт со всеми необходимыми вам признаками. Ведя записи, вы можете составить (построить) свою собственную карту генов каннабиса. К примеру, если кто-то выращивает Blue Berry от известного бридера и интересуется генотипом вкуса для этого сорта вы сможете рассказать что-либо об этом из вашего собсвенного опыта. Может быть однажды мы сможем составлять план каннабиса на генетическом уровне и все будет гораздо проще.
Не горячитесь с количеством признаков, это сумашествие пытаться обособить сразу 1000 признаков. Необходимо сконцентрироваться на основных фенотипах которые сделают ваше растение уникальным в некотором роде. Если вы уже локализовали 4-5 признаков то шаг за шагом следуйте далее – имеено так и выводится IBL сорта. Если кто-то говорит что он получил чистый сорт за 1-2 года вы можете быть уверены что он работал уже с чистым материалом. (Потребовалось 20 лет чтобы получить такие известные чистые сорта, например, Skunk #1 и Afghani#1.)
В конце концов вы получите свой Silver Kush но только с 4 генотипами, которые вы хотели сохранить. И вы все еще можете получить непостоянные вариации у растений в популяции. Некоторые могут иметь пурпурные стебли другие зеленые, некоторые будут сильными некотрые послабее. Постоянно селекционируя новые признаки вы можете получить чистый сорт по каждому признаку. Но существование такого 100% чистого по каждому признаку сорта крайне нежелательно на рынке. Такой сорт назывался бы «Совершенный IBL». Если вы локализовали 90% фенотипов в популяции, тогда вы можете заявить что ваше растение IBL. Я думаю, сейчас этот процент достигаем.
Ключевая идея этого метода – найти растение-донор. Донор – это растение содержащее обособленный признак (гомозиготныый доминантный). Чем больше признаков являются гомозиготными доминантными, тем выше шансы получить IBL сорт.
IBL – In Breed Line. Это не означает что генетическая линия будет чистой для каждого признака, но в общем этот термин используется бридерами в том случае когда при выращивании сорт остается неизменным для высокого % фенотипов этого сорта.
Расмотрим на примере хомяков. В помете мы можем получить всех особей с одинаковыми фенотипами. Если эта популяция будет размножаться без вмешательства других фенотипов, тогда можно сказать что эти хомяки из породистой линии. Если продолжать размножение этих хомяков и все последующие поколения будут с теми же признаками без изменений тогда мы можем быть уверены что их генофонд был локализован.
Существует несколько техник по размножению которые вам может быть понадобятся. Эти методики могут серьезно нарушить закон равновесия Х-В, что в нашем случае может быть полезным, поскольку позволит сократить число признаков в популяции или наоборот способствовать его распространению. Сорт не обязательно может быть чистым по выбранным признакам, но это все равно внесет вклад в постоянство вида по этим признакам.
Кубирование (Cubing) и обратное скрещивание (Backcrossing)
Наш первый гибрид от Master Kush и Silver Haze называется F1 гибридом. Предположим, что у обоих сортов признак, отвечающий за окрас листьев, гомозиготен. У Haze – светло-зеленые листья, у Kush – темно-зеленые. Какой из них доминантный а какой рецессивный мы не знаем, пока не взглянем на потомство.
Результатом F1 гибридизации будут семена гибридов. На этом F1 линия заканчивается. Поскольку M доминирует над m, то можно узнать какой цвет будет доминирующим и от какого родителя он унаследован. Допустим что в нашем потомстве преоблажют светло-зеленые листья, тогда аллель отвечающий за этот цвет листьев доминантным.
M = Silver Haze со светло-злеными листьями доминатный.
m = Master Kush с темно-зелеными листьями рецессивный.
Нам известно что поскольку в популяции не произошло изменений, значит оба родителя гомозиготны по этому признаку. Но тем не менее ВСЕ потомки гетерозиготны.
Клонируя родительское растение MM мы можем использовать клон в скрещивании с Mm потомком. Это называется бэккросс. Очевидно если родитель женское растение то из потомства мы берем мужские растения Mm.
Итак, первое поколение в бэккросе дало 50% гомозиготных по признаку (MM) растений и 50% гетерозиготных (mm). Если бы мы не делали бэккросс и продолжали бы размножение между гетерозиготным поколением мы бы получили 25% гомозиготных доминантных, 50% гетерозиготных и 25% гомозиготных рецессивных растений.
Вы убедились что бэккросс строго контролирует определенный признак в потомстве.
Первый бэккросс называется просто бэккросс. Теперь посмотрим что получится при повторном бэккроссе (сквэринг) с этим же родительским растением, которое мы сохранили посредством клонирования.
Поскольку мы имеем дело только с 2мя типами потомков MM и Mm, то мы либо повторим наши результаты полученные при первом обратном скрещивании
Все потомки будут MM – мы получили чистую породу по этому признаку. Такое потомство результат скворинга. На этом примере показно как легко можно манипулировать популяцией с помощью обратного скрещивания.
Кубирование на практике менее контролируемо чем этот метод. Кубирование – это способ увеличения частоты появления конкретного признака в популяции. Не обязательно, что в результате вы обособите признак в популяции, но зато способствуете его распространению у части растений. Процесс действительного отбора чаще всего случаен.
В популяции мы выбираем материнское растение, которое мы бы хотели сохранить из-за необходимых нам свойств. В этой же популяции мы собираем семена у 50% мужских растений которые имеют схожие с материнским растением признаки, и у 50% мужских растений отличных от материнского растения. Семена смешиваются каждый в своих пропорциях. В итоге мы имеем два пакетика с семенами. Теперь нам надо клонировать материнское растение, чтобы получить 2 женских клона. Затем используем 2 пакетика с семенами на каждый клон в отдельности.
После того как мы получим потомство от этих двух женских растений мы отбираем те из них, которые унаследовали наибольшее количество свойств материнских растений. Причина, по которой мы вязли 2 разных набора семян только в том, чтобы провести контрольный эксперимент показывающий как этот метод влияет на частоты появления генов в генофонде популяции. По правилу, потомство от слабых мужских растений не будет обладать признаками материнского растения. И на практике берутся семена только с сильных мужских растений по свойствам приближенным к материнскому растению.
В этом методе причинами нарушения равновесия Х-В являются неслучайное осеменение и естественный отбор.
Полученное потомство должно обладать высокими вероятностями появления необходимых нам генов в популяции.
Недостаток этого метода в том, что мы не знаем с какого из мужских растений семена опылили женское растение. Но этот метод отнимает меньше времени при создании сорта обладающего постоянством по определенному признаку.
Повторяя процесс мы можем увеличить частоту появления материнских признаков у потомства но скорее всего в результате не все растения будут потсоянны в проявлении этих признаков.
Есть хороший способ усовершенствования этого процесса. Возьмите женское растение и клонируйте его. Опылите эти клоны семенами взятыми от отцовского растения. Потомство должно содержать 50% на 50% генов от обоих родителей. Возьмите семена мужских растений в этом потомстве и смешайте их. Опылите клон материнского растения. Этот шаг должен гарантировать что отбор не случаен и вы распространяете материнские признаки в следующем потомстве. Повторите этот процесс еще 2 раза и вы получите троекратное обратное скрещивание сорта (*3 - кубирование). Это распространит материнские признаки у 90% растений в популяции, но 10% в потомстве будут непостоянными.
Этот метод не позволяет обосабливать признаки как мы это делали в эксперименте с Silver Kush. Здесь мы просто сохраняем некоторые материнские признаки. Кубирование обычная процедура используемая бридерами для сохранения понравившегося им женского растения.
Вы можете получить неудачные результаты если неправильно выберите мужские растения для этого метода.
Самоопыление
Самоопыление - это способность растения производить семена без помощи другого растения. Это относится к гермафродитам. В отношении гермафродитов нет таких понятий как генофонд или популяция, поскольку единственные семена которые использует гермафродит это те которые он производит сам. И мужские и женские цветы расположены на одном растении. Но тем не менее в потомстве возможны вариации.
Практически невозможно для гермафродитов создать чисто мужские растения. Только либо женские растения либо гермафродитов. Семена женских растений могут нести признак отвечающий за гермафродитизм.
Ззамечания по самоопылению от Vic High (BCGA бридер):
[Эти замечания были взяты из Интернета и заслуживают внимания. Ничего не было изменено или опущено.]
Замечания и интервью М-ра XX
Семена 100% женских растений
Posted by TheSiliconMagician on February 13, 1999 at 05:17:41 PT:
Как известно некоторым из вас, я довольно много времени проводил в chat room, имея огромное удовольствие беседовать с Mr. XX последние несколько ночей. Я довольно хорошо узнал его через E-mail и chat. Та получилось что он доверил мне и еще нескольким людям процесс получения 100% семян. Mr. XX очень классный парень. Забавно и огромное удовольствие говорить с ним. Он не слишком хорошо говорит по английски но он очень остроумный и интересный собеседник. Он истинный любитель каннабиса. Он считает что каждый должен помогать и поддерживать друг друга в этом сообществе любителей каннабиса. Он просто хочет поделится секретом своих 15-летних исследований. С разрешения Mr.XX, поскольку он хочет чтобы каждый был способен сделать это. Он подвергал стрессу нерегулярным фотопериодом буквально сотни растений. Что он делал: переводил овещение на 12/12 на 10 дней. Затем включал свет на 24 часа, затем снова 12/12 на несколько дней, затем возвращался к 24 освещению, затем опять 12/12 на несколько недель. При таком освещении он не получал гермафродитов. Он обнаружил 100% XX женское растение которое естественным образом не может стать гермафродитом. Он сказал что ваши шансы найти 100% XX женское растение значительно увеличиваются при использовании растений с Indica генетикой, что чем больше в растении от Afghani или Nepalese, тем выше шансы. Его точные слова были следующими: "Где Мать Природа изначально дала дом траве? Where did Mother Nature give weed a home at originally?" Я пытался получить от него более точные данные о процентном отношении XX женских растений но он никогда не определял этого, только говорил "много XX девочек для каждого" и все. Но для этого требуется много времени и растений чтобы найти одно такое женское растение. Затем он использовал Gibrellic кислоту: на 0.3 литра воды 2 грамма кислоты [Примечание автора: Это неправильное количество смотрите сноску после *. TSM исправил себя позднее, но не в этом письме.]
(Продожение) и 2 капли гидроксида натрия для разбавления кислоты. Затем использовать состав как обычно и произвести мужские цветы. Then applies as normal and creates the male flowers. Он дошел до 4-го поколения растений без потери их силы, без генетических истощений и без гермафродитов. Он заявил, что растения являются ТОЧНЫМ ГЕНЕТИЧЕСКИМ КЛОНОМ друг друга, как сестры, но клонированные из семени.
Posted by TheSiliconMagician on February 13, 1999 at 05:17:41 PT:
Mr.XX также говорит, что для home grower легко найти XX женское растение. Это отнимает очень много времени но зато просто. Необходимо просто ограничиться одним сортом. Mr. XX использовал Skunk#1 x Haze x Hawaiian Indica. Он говорит. что надо отделить эти растения от вашей основной плантации и подвергать их стрессу. Делать это снова и снова с каждым новым урожаем семян которые вы получите до тех пор пока вы не найдете XX женское растение. Поскольку возможно это трудно, то без сомнения может оказаться и безрезультатным. Другая подробность: "Чем уже пальцы на листьях тем труднее найти XX девочек", так что если у вас Columbian Sativa.. возможно вы никогда не найдете ту единственную... он говорит это почти невозможно... TSM
* Поправка: 0.02 грамма кислоты Gibrellic, а НЕ 2 грамма
И на этом заканчивается глава по размножению. Надеемся что в последующих редакциях мы сможем расширить материал и показать вам некоторые примеры. А пока у вас есть достаточно инофрмации чтобы начать самим работать над новым сортом каннабиса.
Хочу поблагодарить Vic High, Chimera и Strawdog за их огромную помощь при написании этой главы.